在心血管疾病研究領域，人類誘導多能干細胞（iPSC）衍生的心臟類器官因其能模擬心臟早期發(fā)育和疾病特征而備受關注。然而，傳統二維微電極陣列僅能記錄平面信號，無法捕捉心臟類器官中電信號的三維傳播動態(tài)，限制了其在心律失常等復雜疾病建模中的應用。近日，約翰斯·霍普金斯大學科研團隊成功開發(fā)出具有可編程特性的形狀自適應殼裝微電極陣列（shell MEA），實現了對三維心臟類器官（Cardiac Organoids）的高時空分辨率電生理信號采集與分析。該成果以"3D Spatiotemporal Electrophysiology of Cardiac Organoids Using Shell Microelectrode Arrays"為題發(fā)表在國際頂級期刊《Advanced Materials》上。心臟類器官通過自組裝形成具有腔室樣結構的微組織，能夠自發(fā)跳動并模擬心臟的電生理特性。然而，傳統電生理記錄技術如二維微電極陣列或膜片鉗存在明顯不足：二維陣列僅能捕獲類器官基底表面的信號，而膜片鉗需要解離類器官，破壞其三維結構且無法進行長期觀測。光學成像技術雖能提供部分時空信息，但易受光漂白和光毒性影響，且穿透深度有限。研究團隊基于自折疊雙分子層原理，設計了一種shell MEA。該陣列由四個十字形片段組成，可在水溶液中自主折疊成籠狀結構，包裹整個類器官表面，其光學透明性允許同時進行鈣離子成像，驗證電生理傳播模式。其核心創(chuàng)新包括：- 定制化幾何結構：可調整電極布局，適應不同尺寸（0.5–1.5 mm直徑）的類器官；
- 高密度電極分布：16個電極均勻覆蓋類器官上、中、下區(qū)域，確保全表面信號采集。
圖1. shell MEA與3D打印微孔集成用于心臟類器官封裝。shell MEA的制造采用五層光刻掩模工藝，在石英晶圓上逐層沉積鍺犧牲層、SU-8絕緣層、金電極和導電聚合物PEDOT:PSS涂層。通過調控SU-8雙分子層的交聯度和厚度，可實現可控的折疊角度和時間。團隊采用摩方精密microArch® S240 （精度：10μm）高精度3D打印機和生物相容性樹脂（BIO）材料制造定制化微孔板，確保類器官精準定位到 shell MEA中心。微孔板通過UV固化后，與shell MEA基底牢固粘合，形成完整的檢測系統。這一技術突破避免了傳統手動操作的誤差，為高通量應用奠定了基礎。為驗證殼層MEA在心臟毒性篩選中的應用潛力，團隊測試了9天內異丙腎上腺素（正性肌力藥物）、E-4031（hERG通道阻滯劑）和血清素對心肌類器官電生理參數的影響：- 異丙腎上腺素（10 μM）導致場電位振幅增加81%、跳動頻率上升84%、場電位持續(xù)時間延長12%，符合其正性變時和變力作用；
- E-4031（1 μM）引起頻率下降34%、持續(xù)時間延長64%，模擬了心律失常風險；這些結果與臨床前數據一致，驗證了 shell MEA在藥物心臟毒性評估中的可靠性。
圖3. shell MEA的特性分析，用于優(yōu)化心臟類器官的電生理記錄。圖4. 連續(xù)記錄與藥理響應監(jiān)測。通過檢測局部激活時間（LAT），團隊生成了高分辨率三維等時線圖?；谧畲笮甭史ǎǚ钦穹ǎ┑腖AT檢測準確率達87.5%，顯著優(yōu)于傳統方法（69.6%）。插值算法（徑向基函數）將16個電極數據轉化為全表面激活序列，揭示類器官內電信號傳播路徑（如從左至右，延遲約15 ms）。更重要的是，殼層MEA的透明性允許同步鈣成像驗證。對比顯示，三維電生理映射與鈣成像激活圖高度相關，但三維映射測得的傳導速度（CV）更高。這種差異源于鈣成像的時空分辨率限制及二維投影的片面性，突顯了三維全表面記錄的優(yōu)勢。圖5. 自發(fā)性跳動的心臟類器官的三維活化映射。
在異丙腎上腺素處理后，三維CV映射進一步顯示傳導加速（均值從5.12升至6.28 cm/s），且傳播模式呈現區(qū)域異質性，提示類器官內細胞類型分布不均。這種空間分辨能力為研究心律失常機制（如傳導阻滯或折返）提供了新工具。
圖6. 3D傳導速度映射及與鈣成像的一致性驗證。
總結：研究團隊開發(fā)的殼層微電極陣列技術，通過全表面三維電生理映射，解決了心臟類器官研究中的關鍵瓶頸。其創(chuàng)新設計、長期監(jiān)測能力及多模態(tài)集成優(yōu)勢，為心臟疾病建模和藥物測試提供了更精準、高效的平臺。這一突破不僅推動了類器官技術的功能化進展，還可擴展至腦類器官、骨骼肌類器官等電活性組織模型。其高通量制造潛力（晶圓級加工）與微機電系統（MEMS）兼容性，為大規(guī)模藥物篩選和個性化醫(yī)療奠定基礎。
更新時間：2025-10-20
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